組織培養(yǎng)是什么?操作步驟是什么？

植物組織培養(yǎng)是什么？

植物組織培養(yǎng)是在無菌的情況下，將植物體內(nèi)的某一部分器官或組織，如莖尖、芽尖、形成層、根尖、胚芽和莖的髓組織等從植物體上分離下來，放在適宜培養(yǎng)基上培養(yǎng)，經(jīng)過一段時(shí)間的生長、分化最后長成一個(gè)完整的植株。

植物組織培養(yǎng)廣義又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。

植物組織培養(yǎng)狹義是指用植物各部分組織，如形成層、薄壁組織、葉肉組織、胚乳等進(jìn)行培養(yǎng)獲得再生植株，也指在培養(yǎng)過程中從各器官上產(chǎn)生愈傷組織的培養(yǎng)，愈傷組織再經(jīng)過再分化形成再生植物。

植物組織培養(yǎng)操作步驟是什么？

1、將采來的植物材料除去不用的部分，將需要的部分仔細(xì)洗干凈，如用適當(dāng)?shù)乃⒆拥人⑾础０巡牧锨懈畛蛇m當(dāng)大小，即滅菌容器能放入為宜。置自來水龍頭下流水沖洗幾分鐘至數(shù)小時(shí)，沖洗時(shí)間視材料清潔程度而宜。易漂浮或細(xì)小的材料，可裝入紗布袋內(nèi)沖洗。流水沖洗在污染嚴(yán)重時(shí)特別有用。洗時(shí)可加入洗衣粉清洗，然后再用自來水沖凈洗衣粉水。洗衣粉可除去輕度附著在植物表面的污物，除去脂質(zhì)性的物質(zhì)，便于滅菌液的直接接觸。當(dāng)然，最理想的清洗物質(zhì)是表面活性物質(zhì)-吐溫。

2、對材料的表面浸潤滅菌。要在超凈臺或接種箱內(nèi)完成，準(zhǔn)備好消毒的燒杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、無菌水、手表等。用70%酒精浸10~30秒。由于酒精具有使植物材料表面被浸濕的作用，加之70%酒精穿透力強(qiáng)，也很易殺傷植物細(xì)胞，所以浸潤時(shí)間不能過長。有一些特殊的材料，如果實(shí)、花蕾、包有苞片、苞葉等的孕穗，多層鱗片的休眠芽等等，以及主要取用內(nèi)部的材料，則可只用70%酒精處理稍長的時(shí)間。處理完的材料在無菌條件下，待酒精蒸發(fā)后再剝除外層，取用內(nèi)部材料。

3、用滅菌劑處理。表面滅菌劑的種類較多，可根據(jù)情況選取1~2種使用見表。第四步是用無菌水涮洗，涮洗要每次3min左右，視采用的消毒液種類，涮洗3~10次左右。無菌水涮洗作用是免除消毒劑殺傷植物細(xì)胞的副作用注意:

①酒精滲透性強(qiáng)，幼嫩材料易在酒精中失綠，所以浸泡時(shí)間要短，防止酒精殺死植物細(xì)胞。

②老熟材料，特別是種子等可以在酒精中浸泡時(shí)間長一些，如種子可以浸泡5分鐘。

③升汞的滲透力弱，一般浸泡10分鐘左右，對植物材料的殺傷力不大。

④漂白粉容易導(dǎo)致植物材料失綠，所以對于幼嫩材料要慎用。

⑤在消毒液中加入濃度為0.08~0.12%的吐溫20或80(一種濕潤劑)，可以降低植物材料表面的張力，達(dá)到更好的消毒效果。